Centrifugatie is een scheidingsmethode waarbij de toepassing van de centrifugale kracht een heterogeen mengsel sedimenteert of fractioneert. Microcentrifugatie, centrifugeren met hoge snelheid en ultracentrifugatie zijn de drie typen centrifugatie op basis van het volume en de snelheid die in het proces worden gebruikt. Naast andere centrifugeringsmethoden gebruikt ultracentrifugatie de maximale hoeksnelheid. De rotatiesnelheid van ultracentrifugatie is zo hoog als 1 000 000 g. Aldus wordt ultracentrifugatie gebruikt om kleine deeltjes zoals ribosomen, eiwitten en virussen te isoleren. Preparatieve en analytische centrifugatie zijn de twee soorten ultracentrifugatiemethoden. De grootste verschil tussen preparatieve en analytische centrifugatie is dat preparatieve centrifugatie wordt gebruikt voor het pelletiseren van kleine materialen zoals membranen, organellen, virussen, DNA en RNA, terwijl analytische centrifugatie wordt gebruikt om de massa en de vorm van macromoleculen te bepalen, zoals eiwitcomplexen en snelheid van sedimentatie van moleculen.
1. Wat is preparatieve centrifugatie
- Definitie, feiten, gebruik
2. Wat is analytische centrifuge
- Definitie, feiten, gebruik
3. Wat zijn de overeenkomsten tussen preparatieve en analytische centrifuge
- Overzicht van gemeenschappelijke functies
4. Wat is het verschil tussen preparatieve en analytische centrifuge
- Vergelijking van belangrijke verschillen
Sleutelbegrippen: analytische centrifugatie, analytische processen, dichtheidsgradiëntcentrifugatie, hogesnelheidcentrifuge, preparatieve centrifugatie, kleine deeltjes
Preparatieve centrifugatie verwijst naar een centrifuge met hoge snelheid die wordt gebruikt bij de scheiding van kleine submicroscopische deeltjes. Het scheidt kleine deeltjes zoals virussen, virale deeltjes, eiwitcomplexen, eiwitten, lipoproteïnen, RNA en plasmide-DNA. Een Beckman-Coulter preparatieve centrifuge met zijn rotor erin is afgebeeld in Figuur 1.
Figuur 1: Voorbereidende centrifuge Beckman-Coulter
De preparatieve centrifugatie kan ook worden gebruikt als een dichtheidsgradiënt centrifugatiewerkwijze. De sucrosegradiënt kan worden gebruikt om cellulaire organellen te scheiden. Cesiumgradiënt kan worden gebruikt om nucleïnezuren te scheiden.
Analytische centrifugatie verwijst naar een centrifuge met hoge snelheid die wordt gebruikt in de analytische processen. Het wordt gebruikt om informatie te verkrijgen over de soorten moleculen in een bepaald monster door de algehele vorm, conformatieveranderingen en stoichiometrie van de subeenheden te kennen. Het kan ook worden gebruikt om de sedimentatiesnelheid van deeltjes te bepalen. Een ultracentrifuge wordt getoond in Figuur 2.
Figuur 2: Beckman Coulter Optima LE-80K Ultracentrifuge
Een optische detectiesysteem is voorzien van de analytische centrifuge om het spinnen van het monster in real time te volgen. Sedimentatiesnelheidsexperimenten en sedimentatie-evenwichtsexperimenten zijn de twee hoofdtypen experimenten die worden uitgevoerd met analytische centrifugatie.
Preparatieve centrifuge: Preparatieve centrifugatie verwijst naar een centrifuge met hoge snelheid die wordt gebruikt bij de scheiding van kleine submicroscopische deeltjes.
Analytische centrifuge: Analytische centrifugatie verwijst naar een centrifuge met hoge snelheid die wordt gebruikt in de analytische processen.
Preparatieve centrifuge: Preparatieve centrifugatie kan niet worden gebruikt in analytische procedures.
Analytische centrifuge: Analytische centrifugatie wordt gebruikt in analytische procedures.
Preparatieve centrifuge: Preparatieve centrifugatie wordt gebruikt voor het pelletiseren van kleine materialen zoals membranen, organellen, virussen, plasmide-DNA en RNA.
Analytische centrifuge: Analytische centrifugatie wordt gebruikt om de massa en vorm van macromoleculen te bepalen, zoals eiwitcomplexen en snelheid van sedimentatie van moleculen.
Preparatieve centrifuge: Een grote steekproefomvang kan worden verwerkt in preparatieve centrifigatie.
Analytische centrifuge: Alleen kleine monstervolumes (minder dan 1 ml) kunnen worden verwerkt door analytische centrifugatie.
Preparatieve centrifuge: Minder zuivere monsters kunnen worden gebruikt bij preparatieve centrifugatie.
Analytische centrifuge: Relatief zuivere monsters worden gebruikt bij de analytische centrifugatie.
Preparatieve centrifuge: Preparatieve centrifugatie kan worden gebruikt om de sedimentatiecoëfficiënt en het molecuulgewicht te bepalen.
Analytische centrifuge: Een nauwkeurige sedimentatiecoëfficiënt en molecuulgewicht worden gebruikt in analytische centrifugatie.
Preparatieve centrifuge: De fracties kunnen na de run worden verzameld in preparatieve centrifugatie en er is geen optische uitlezing tijdens de run.
Analytische centrifuge: De voortgang van de analytische centrifugatie kan visueel worden waargenomen tijdens analytische centrifugatie.
Preparatieve centrifuge: Er worden geen koelingsregelingen gebruikt bij de preparatieve centrifugering.
Analytische centrifuge: Aangezien hoge snelheid meer warmte genereert, moet bij de analytische centrifugering een koelinrichting worden gebruikt
Preparatieve centrifuge: L5-65 en L5-75 worden gebruikt bij de preparatieve centrifugatie.
Analytische centrifuge: Beckman Model E wordt gebruikt bij de analytische centrifugatie.
Preparatieve en analytische centrifugatie zijn de twee soorten ultracentrifugatiemethoden die centrifugering met hoge snelheid gebruiken. Preparatieve centrifugatie wordt gebruikt om kleine deeltjes zoals ribosomen, plasmide-DNA en RNA te scheiden. Analytische centrifugatie wordt echter hoofdzakelijk gebruikt om analytische metingen van het monster te verkrijgen. Het belangrijkste verschil tussen preparatieve en analytische centrifugatie is het doel van elk type centrifugatie tijdens de monsterverwerking.
1. Aswathi K S, student aan de centrale universiteit van Kerala Volgen. “Ultracentrifugatie.” LinkedIn SlideShare, 17 nov. 2015, hier beschikbaar.
1. "Beckman-Coulter preparatieve centrifuge Avanti J25-03" Eigen naam: Matylda Sękpl.wiki: Cygaretkacommons: Cygaretka - Eigen werk (CC BY-SA 3.0) via Commons Wikimedia
2. "Ultracentrifuge" door Mlw3559 op Engels Wikibooks (CC BY-SA 2.5) via Commons Wikimedia