Immunocytochemistry (ICC) en Immunohistochemistry (IHC) zijn twee veel gebruikte technieken in moleculaire diagnostiek, die het voorkomen van zowel niet-overdraagbare ziekten als overdraagbare ziekten identificeert en bevestigt op basis van de moleculaire markers die op cellen aanwezig zijn. Het belangrijkste verschil tussen immunocytochemie en immunohistochemie is het molecuul dat wordt gebruikt als de analyseprocedure in deze technieken. In ICC worden primaire en secundaire antilichamen geconjugeerd met markers zoals fluorescentie, terwijl IHC, monoklonale en polyklonale antilichamen worden gebruikt voor de diagnostische bepalingen..
1. Overzicht en belangrijkste verschil
2. Wat is immunocytochemie
3. Wat is immunohistochemie
4. Overeenkomsten tussen immunocytochemie en immunohistochemie
5. Vergelijking zij aan zij - Immunocytochemie versus immunohistochemie in tabelvorm
6. Samenvatting
ICC gebruikt primaire en secundaire antilichamen gebonden aan markers zoals fluorescente markers of enzymen en is een krachtige detectiemethode om antigenen te detecteren die aanwezig zijn op doelwitcellen, die ofwel infectieuze cellulaire deeltjes of kankerachtige tumorcellen kunnen zijn. Drie soorten controles zijn vereist voor immunocytochemie.
Figuur 01: Immunocytochemie labelt afzonderlijke eiwitten in cellen (hier worden tyrosinehydroxylase in de axonen van sympathische autonome neuronen in groen weergegeven).
De primaire antilichaamcontrole is specifiek voor elk nieuw antilichaam en kan niet voor elk experiment worden herhaald. De secundaire antilichaamcontrole wordt ontworpen op basis van het primaire antilichaam dat in het experiment wordt gebruikt en is bij elk experiment inbegrepen. De controle op de labels wordt opgenomen als een voorwaarde van de procedure wordt gewijzigd, het monster wordt gewijzigd of als onverwachte labels worden gevonden.
De twee belangrijkste toepassingen van ICC zijn Radio Immuno - Assay (RIA) en Enzyme Linked Immunosorbent Assay (ELISA). Het meest gebruikte antilichaam dat wordt gebruikt, is het immunoglobuline G.
In de immunohistochemie bevat het bronmonster monoklonale en polyklonale antilichamen om de aanwezigheid van antigenen in vreemde cellen te bepalen. Deze techniek is gebaseerd op de specifieke reactie van binding van antigeen-antilichaam. De antilichamen die bij detectie worden gebruikt, kunnen worden gelabeld met verschillende markers; dit kunnen fluorescentiemerkers zijn, radioactief gemerkte markers of chemische markers. Door te faciliteren in vitro binding tussen het antigeen en het antilichaam waarop wordt gericht, kan de aanwezigheid of de afwezigheid van een bepaald eiwit van een cel worden bepaald.
Figuur 02: Immunohistochemische kleuring van normale nier met CD10
Momenteel zijn wetenschappers betrokken bij het ontwikkelen van doelwitantilichamen voor specifieke antigenen die aanwezig zijn in cellen die ofwel kunnen ontwikkelen als kwaadaardige tumorcellen of antigenen die aanwezig zijn in infectieuze agentia zoals HIV.
Immunocytochemistry (ICC) vs Immunohistochemistry (IHC) | |
ICC gebruikt primaire en secundaire antilichamen gebonden markers zoals fluorescente markers of enzymen en is een krachtige detectiemethode om antigenen te detecteren die aanwezig zijn op doelcellen. | IHC is een methode die gebruikmaakt van monoklonale en polyklonale antilichamen om de aanwezigheid te bepalen van antigenen die speciale eiwitmarkers zijn die op de celoppervlakken worden geplaatst. |
Voorbeeldbron | |
Monsters afgeleid van weefsels die histologisch zijn verwerkt tot dunne coupes worden gebruikt in ICC. | IHC gebruikt monsters die bestaan uit cellen die zijn gekweekt in een monolaag of cellen in suspensie die zijn afgezet op een glaasje. |
Voorbeeldverwerking | |
In ICC moeten cellen permeabel zijn om penetratie van antilichamen tegen de intracellulaire doelwitten mogelijk te maken. | In IHC zijn cellen formaline-gefixeerd, ingebed in paraffine voorafgaand aan kleuring. |
Moleculaire diagnostiek wordt gebruikt om het voorkomen van zowel niet-overdraagbare ziekten als overdraagbare ziekten te identificeren en te bevestigen op basis van de moleculaire markers die op cellen aanwezig zijn. Moleculaire merkers kunnen eiwitten of sequenties van DNA of RNA zijn; de ontwikkeling van technologieën zoals ICC en IHC hebben de weg geëffend voor wetenschappers om de ziekte en de oorzaak in een vroeg stadium te identificeren. Zowel ICC als IHC hangen af van de specifieke reacties tussen antilichaam en antigeen, hoewel de bron van het monster. Het belangrijkste verschil tussen immunocytochemie en immunohistochemie is de monsterverwerking van de twee procedures.
U kunt de PDF-versie van dit artikel downloaden en gebruiken voor offline doeleinden, zoals per citaatnotitie. Download hier de pdf-versie Difference Between Immunocytochemistry and Immunohistochemistry.
1. Burry, Richard W. "Controls for Immunocytochemistry: An Update." Journal of Histochemistry and Cytochemistry, SAGE Publications, jan. 2011, Beschikbaar Hier. Betreden 24 augustus 2017.
2. Duraiyan, Jeyapradha, et al. "Toepassingen van immunohistochemie." Journal of Pharmacy & Bioallied Sciences, Medknow Publications & Media Pvt Ltd, aug. 2012, Beschikbaar Hier. Betreden 24 augustus 2017.
1. "Immunohistochemie" door Swharden - Eigen werk (CC BY-SA 3.0) via Commons Wikimedia
2. "Nier cd10 ihc" door Nephron - Eigen werk (CC BY-SA 3.0) via Commons Wikimedia