Verschil tussen HPLC en LCMS

Belangrijkste verschil - HPLC versus LCMS
 

Laten we eerst eens kijken naar de betekenis van HPLC en LCMS voordat we het verschil tussen HPLC en LCMS analyseren. Chromatografie is een scheidingstechniek in chemische analyse waarbij monsterbestanddelen worden gescheiden tijdens passage door een chromatografisch medium. Het omvat ook interactie met het monster, de stationaire fase en de mobiele fase. HPLC staat voor Hoogwaardige vloeistofchromatografie, en het wordt gebruikt als een vloeistofchromatografiemethode in analytische chemie. De combinatie van Vloeistofchromatografie en massaspectroscopie (LCMS) is ontwikkeld voor de kwantitatieve analyse van geselecteerde biomoleculen en dat is het ook een zeer gevoelige, nauwkeurige en specifieke testprocedure vergeleken met HPLC. Dit is de sleutel verschil tussen HPLC en LCMC. Dit artikel introduceert u bij HPLC en LCMC die zich bezighouden met chemische analyse en bespreken de verschillen tussen HPLC en LCMS.

Wat is HPLC?

Hoogwaardige vloeistofchromatografie (HPLC) is populair scheidingstechniek in analytische chemie. Het is voornamelijk gebruikt om de componenten te scheiden, om elke component in een mengsel te identificeren en te kwantificeren. Eerder stond deze methode bekend als hogedrukvloeistofchromatografie omdat het afhankelijk was van pompen om een ​​onder druk staand vloeibaar oplosmiddel dat het monstermengsel bevatte te laten stromen door een kolom die was gepakt met een vast adsorberend materiaal. Elk bestanddeel in het monster-mengsel heeft een wisselwerking met het vaste adsorberende materiaal, wat resulteert in verschillende stroomsnelheden voor verschillende bestanddelen. Dit kan leiden tot de scheiding van de bestanddelen wanneer ze uit de HPLC-kolom stromen.

HPLC is gebruikt voor verschillende toepassingen zoals analyse van vitamine D-spiegels in het bloed, illegaal drugsgebruik van atleten door de medicijnresten in hun urine te detecteren, het uitzoeken van de bestanddelen van een complex biologisch monster voor onderzoeksdoeleinden en analyse en productie van farmaceutische producten.

Wat is LCMS?

Vloeistofchromatografie-massaspectrometrie (LCMS) is een analytische techniek die de fysische scheidingsvermogens van vloeistofchromatografie combineert met de massaanalysemogelijkheden van massaspectrometrie (MS). Vloeistofchromatografie is een scheidingstechniek en massaspectrometrie wordt gebruikt om de massa-tot-ladingverhouding van geladen deeltjes te analyseren. De fysieke scheiding wordt meestal bereikt door middel van HPLC en als alternatief is LCMS ook bekend als HPLC-MS. LCMS is een dominante analytische techniek dat heeft een zeer hoge nauwkeurigheid, gevoeligheid en specificiteit vergeleken met HPLC. Het is dus nuttig in veel toepassingen, zoals onderzoeksdoeleinden, medicijnanalyse, voedselanalyse, enz. LCMS is hoofdzakelijk gebruikt om biochemische eigenschappen te scheiden, te detecteren, te identificeren en te kwantificeren van een bepaald monster in de aanwezigheid van complexe chemische mengsels.

Wat is het verschil tussen HPLC en LCMC?

Acroniem en definitie van HPLC en LCMC

HPLC: HPLC staat voor High-Performance Liquid Chromatography. Het is een scheidingstechniek die voornamelijk wordt gebruikt om de componenten te scheiden, om elke component in een mengsel te identificeren en te kwantificeren.

LCMS: LCMS staat voorVloeistofchromatografie en massaspectrometrie. Het is een analytische techniek die de fysische scheidingsvermogens van vloeistofchromatografie combineert met de massaanalysemogelijkheden van massaspectrometrie (MS).

Eigenschappen van HPLC en LCMC

Classificatie

HPLC: Dit is alleen een methode voor vloeistofchromatografie.

LCMS: Dit is een combinatie van de methode voor vloeibare chromatografie en massaspectrometrie.

rendement

HPLC: In vergelijking met LCMS is de HPLC-analyse minder efficiënt en langzamer.

LCMS: In vergelijking met HPLC is de LCMS-analyse efficiënt en sneller.

Gevoeligheid

HPLC: In vergelijking met LCMS is de HPLC-analyse minder gevoelig.

LCMS: In vergelijking met HPLC is de LCMS-analyse gevoeliger.

specificiteit

HPLC: In vergelijking met LCMS is de HPLC-analyse minder specifiek.

LCMS: In vergelijking met HPLC is de LCMS-analyse specifieker.

Nauwkeurigheid

HPLC: HPLC geeft minder nauwkeurige resultaten dan LCMS voor de bepaling van sommige chemicaliën.

LCMS: LCMS geeft meer nauwkeurige resultaten dan HPLC voor de bepaling van sommige chemicaliën.

bestanddeel

HPLC: HPLC kan worden beschouwd als een onderdeel van LCMS.

LCMS: LCMS kan niet worden beschouwd als een onderdeel van HPLC.

Ionenbron

HPLC: Ionenbron bestaat niet in HPLC-instrument.

LCMS: Ionenbron is aanwezig in LCMS-instrument.

toepassingen

HPLC: Ionen, polymeren, organische moleculen en biomoleculen kunnen worden geanalyseerd met behulp van HPLC.

LCMS: Organische moleculen en biomoleculen kunnen worden geanalyseerd. In contrast met HPLC kan LCMS worden gebruikt om onvolledig opgeloste mengsels te onderzoeken.

Operatie

HPLC: Het diagram van een HPLC-instrument wordt gegeven in figuur 1 en omvat meestal een autosampler, pompen en een detector. De sampler introduceert het monstermengsel in de mobiele fase (onder druk gebracht mengsel van oplosmiddelen zoals water, acetonitril en / of methanol) dat het naar de kolom overbrengt. De pompen leveren de gewenste stroom en samenstelling van de mobiele fase door de kolom. De kolom is gevuld met het adsorbens, dat een korrelig vast deeltje is zoals silica of polymeren. De detector produceert een signaal dat evenredig is aan de hoeveelheid aanwezigheid van het monsterbestanddeel in de kolom en maakt daarom kwantificeerbare analyse van de geselecteerde monsterbestanddelen mogelijk. Het HPLC-instrument wordt bestuurd en gegevensanalyse wordt verzorgd door een digitale microprocessor en gebruikerssoftware.

Figuur 1: Diagram van HPLC-instrument

LCMS: Het diagram van het LCMS-instrument is weergegeven in figuur 2. Het monsterextract wordt ingevoegd in de kolom die bestaat uit HPLC. Deze kolom behoudt monstermetabolieten op basis van fysieke kenmerken en verschillende metabolieten stromen op verschillende tijdsintervallen naar de massaspectrometer. Massaspectroscopie wordt gebruikt voor het bepalen van massa's deeltjes, voor het bepalen van de elementaire rangschikking van een molecuul en voor het verduidelijken van de molecuulstructuren. Het monster moet echter worden geïoniseerd om geladen moleculen te genereren om hun massa-tot-lading-verhoudingen te bepalen. Daarom bestaan ​​LCMS in plaats van HPLC-instrumenten uit drie bijkomende modules, zoals een ijzerbron, een massa-analysator en een detector. Een ionenbron kan gasfasemonsters in ionen transformeren en een massa-analysator die de ionen met hun massa groepeert met behulp van elektromagnetische velden. Tenslotte kwantificeert een detector de waarden en levert data van elk ion aanwezig in het monster. De LCMS-techniek kan worden gebruikt voor zowel kwalitatieve als kwantitatieve toepassingen.

  Figuur 2: Diagram van LCMS-instrument

Concluderend, HPLC is een methode voor vloeistofchromatografie, terwijl LCMS een combinatie is van vloeistofchromatografie en massaspectrometrie. Beide analysetechnieken hebben verschillende kenmerken, maar ze kunnen worden gebruikt voor het identificeren en kwantificeren van voedingssamenstellingen, farmaceutische producten en andere bioactieve moleculen.

Referenties Arpino, P. (1992). Gecombineerde vloeistofchromatografie massaspectrometrie. Deel III. Toepassingen van thermosproeien. Massaspectrometrie beoordelingen, 11: 3. Gerber, F., Krummen, M., Potgeter, H., Roth, A., Siffrin, C. en Spoendlin, C. (2004). Praktische aspecten van snelle reversed-phase high-performance vloeistofchromatografie met behulp van 3μm deeltjesverpakte kolommen en monolithische kolommen in farmaceutische ontwikkeling en productie werken onder de huidige goede productiepraktijken. Journal of Chromatography, 1036 (2): 127-133. Lee, M.S. en Kerns, E.H. (1999). LC / MS-toepassingen bij de ontwikkeling van geneesmiddelen. Massaspectrometrie beoordelingen, 18 (3-4): 187-279. Murray, K.K. (1997). Koppeling van matrix-geassisteerde laserdesorptie / ionisatie aan vloeistofscheidingen. Massaspectrometrie beoordelingen 16 (5): 283. Hoffelijkheid met afbeeldingen: "Hplc" door Original-uploader was Kjaergaard op en.wikipedia - Overgezet van en.wikipedia. (Publiek domein) via burgerij