Verschil tussen HPLC en UPLC

De belangrijk verschil tussen HPLC en UPLC is dat het HPLC maakt de analyse mogelijk van deeltjes met een grootte van ongeveer 5 micrometer, terwijl UPLC veel kleinere deeltjes rond 2 micrometer mogelijk maakt.

HPLC en UPLC zijn beide technieken voor vloeistofchromatografie die nuttig zijn bij het scheiden van de componenten van een verbinding. Om het verschil tussen HPLC en UPLC te kennen, moeten we eerst weten wat HPLC is. Dit komt omdat UPLC een speciale versie van HPLC is en we kunnen het gemakkelijk begrijpen als we weten wat HPLC is.

INHOUD

1. Overzicht en belangrijkste verschil
2. Wat is HPLC
3. Wat is UPLC
4. Vergelijking zij aan zij - HPLC vs UPLC in tabelvorm
5. Samenvatting

Wat is HPLC?

De term HPLC staat voor High Performance Vloeistofchromatografie. Het is een techniek die we kunnen gebruiken om verschillende bestanddelen van een verbinding te scheiden. Het is ook de meest gebruikte techniek om componenten van een mengsel te identificeren, kwantificeren en scheiden. Bovendien gebruikt deze techniek een hoge druk om oplosmiddelen door de kolom te duwen. Bovendien zijn de belangrijkste toepassingen van HPLC in de biochemie voor de analyse van bestanddelen van een verbinding. Het is een ideale manier voor de scheiding en identificatie van aminozuren, nucleïnezuren, eiwitten, koolwaterstoffen, pesticiden, koolhydraten, antibiotica, steroïden en talloze andere anorganische stoffen.

Figuur 01: HPLC-systeem in een laboratorium

In het kort is de werkwijze van de werking van de HPLC-techniek als volgt. Ten eerste zouden we het monster in discrete kleine hoeveelheden in de stroom mobiele fase moeten introduceren met behulp van een pomp. De pompdruk moet op 40 MPa worden gehouden. Vervolgens percoleert deze stroom mobiele fase door de kolom van HPLC. Ook passeren de componenten in het monster de kolom. Hun bewegingssnelheden verschillen echter van elkaar. Dit verschil ontstaat als gevolg van het verschil in de interacties tussen de monstercomponenten en het adsorbens in de kolom. We noemen dit adsorbens de stationaire fase omdat het zich in de kolom bevindt (niet beweegt). Ten tweede kunnen we aan het einde van de kolom het monster verzamelen dat uit de kolom elueert. Daar kunnen we de verschillen in retentietijden bepalen voor elk onderdeel in het monster.

Wat is UPLC?

De term UPLC staat voor Ultrahoge prestaties vloeistofchromatografie. Het is een variatie op HPLC, maar de werkwijze is hetzelfde. In tegenstelling tot HPLC kunnen met deze methode zeer kleine deeltjes worden geanalyseerd, zoals kleine deeltjes van 2 micrometer.

Afbeelding 02: een UPLC-apparaat

Bovendien biedt het een snellere analyse. Bij deze techniek gebruiken we een pompdruk van 100 MPa voor het inbrengen van het monster in de kolom. Vandaar dat deze hoge druk bevestigt dat het gehele monster in de kolom wordt ingebracht. Dit is dus zeer efficiënt in vergelijking met HPLC.

Wat is het verschil tussen HPLC en UPLC?

De term HPLC staat voor High Performance Liquid Chromatography terwijl de term UPLC staat voor Ultra High Performance Liquid Chromatography. Daarom is de UPLC-techniek een ontwikkelde versie van HPLC. Aldus is de werkwijze voor beide technieken hetzelfde. UPLC is echter efficiënter in vergelijking met HPLC omdat het een hoge pompdruk gebruikt; de pompdruk voor HPLC is 40 MPA terwijl deze 100 MPa is voor UPLC. Daarom is dit een verschil tussen HPLC en UPLC. Bovendien is het belangrijkste verschil tussen HPLC en UPLC dat de HPLC analyse van deeltjes met een grootte van ongeveer 5 micrometer mogelijk maakt, terwijl UPLC veel kleinere deeltjes rond 2 micrometer mogelijk maakt.

Samenvatting - HPLC vs UPLC

UPLC is een vorm van HPLC. De bedieningsmethoden zijn dus hetzelfde. Maar we kunnen enkele verbeterde functies vinden in UPLC in vergelijking met HPLC. Daarom is er enig verschil tussen HPLC en UPLC. Het belangrijkste verschil tussen HPLC en UPLC is echter dat de HPLC analyse van deeltjes met een grootte van ongeveer 5 micrometer mogelijk maakt, terwijl de UPLC veel kleinere deeltjes rond 2 micrometer mogelijk maakt.

Referentie:

1. "Vloeistofchromatografie met hoge prestaties." Wikipedia, Wikimedia Foundation, 20 oktober 2018. Beschikbaar Hier
2. "UPLC." Wikipedia, Wikimedia Foundation, 25 oktober 2017. Beschikbaar Hier  

Afbeelding met dank aan:

1. "Hplc" door Kjaergaard op English Wikipedia (Public Domain) via Commons Wikimedia 
2. "Afbeelding van een UPLC-apparaat" door Groep29 BFW - Eigen werk, (Public Domain) via Commons Wikimedia