Verschil tussen gramkleuring en cultuur

Belangrijkste verschil - Gramkleuring versus cultuur

Gramkleuring is een kleurtechniek die wordt toegepast om bacteriën te onderscheiden in twee groepen, afhankelijk van de dikte van de peptidoglycaanlaag in hun celwand. Cultuur is een methode voor het kweken en handhaven van micro-organismen onder laboratoriumomstandigheden voor verschillende analyses. Het belangrijkste verschil tussen gram-kleur en cultuur is hun functie; gram stam een kleuringstechniek van bacteriën waarbij kweken een methode is voor het kweken en handhaven van micro-organismen.

INHOUD
1. Overzicht en belangrijkste verschil
2. Wat is Gramkleuring
3. Wat is cultuur
4. Vergelijking zij aan zij - Gramkleuring versus cultuur
5. Samenvatting

Wat is Gramkleuring?

Gramkleuring is een belangrijke differentiële kleurtechniek die wordt gebruikt voor bacteriële identificatie in de microbiologie. Deze techniek werd geïntroduceerd door de Deense bacterioloog Hans Christian Gram in 1884. Gramkleuring categoriseert bacteriën in twee hoofdgroepen: grampositief en gramnegatief; deze zijn erg belangrijk bij bacteriële classificatie en identificatie. Gram-kleuring wordt uitgevoerd als een eerste stap voor bacteriële karakterisering.

Bacteriën zijn gegroepeerd op basis van de verschillen in hun celwand. Gram-positieve bacteriën bevatten een dikke peptidoglycanlaag in hun celwand, terwijl Gram-negatieve bacteriën een dunne peptidoglycanlaag in hun celwand bevatten, zoals weergegeven in figuur 01. De uitkomst van de gramkleuring zal gebaseerd zijn op het dikteverschil in de peptidoglycaanlaag van de cel. celwand.

Figuur 1: Gram-positieve bacteriën en Gram-negatieve bacteriën

Gramkleuring wordt uitgevoerd met behulp van vier verschillende reagentia namelijk; primaire vlek, beitsmiddel, ontkleuringsmiddel en tegenkleuring. Kristalviolet en safranine dienen als respectievelijk de primaire en contravlekken, terwijl de gram jodium en 95% alcohol respectievelijk dienen als bijtmiddel en ontkleuringsmiddel.

Basisstappen van Gram-vlek

Een bacteriële uitstrijk wordt bereid op een schoon glasplaatje, de warmte wordt gefixeerd en gekoeld.
Uitstrijkje wordt overspoeld met kristalviolet gedurende 1 - 2 minuten.
Smeer wordt gespoeld met langzaam stromend leidingwater om overtollige vlekken te verwijderen.
Gram-jodium wordt gedurende 1 minuut op het uitstrijkje aangebracht.
Smeer wordt gespoeld met langzaam stromend kraanwater
Smeer wordt gewassen met 95% alcohol gedurende 2-5 seconden en gespoeld met langzaam stromend leidingwater.
Smear is gedurende 1 minuut in tegenaanval gekleurd met safranin
Smeer wordt gespoeld met langzaam stromend kraanwater, gedroogd en onder de microscoop waargenomen.

Aan het einde van de gramkleuring zullen gram-negatieve bacteriën in roze kleur worden waargenomen, terwijl de gram-positieve bacteriën in paarse kleur zullen worden waargenomen, zoals weergegeven in afbeelding 02. Het resultaat van de gramkleuring wordt bepaald door de dikte van de peptidoglycanlaag in hun celwand. Tijdens de ontkleuringsstap worden primaire kleuring en het beitsmiddel gemakkelijk uit de gramnegatieve bacteriën verwijderd en worden kleurloos, omdat ze een dunne peptidoglycanlaag hebben. De primaire vlek wordt behouden in de grampositieve bacteriën omdat ze een dikke peptidoglycanlaag hebben. Tegenkleuring zal niet effectief zijn voor gram-positieve bacteriën als gevolg van de retentie van de primaire kleuring. Dus gram-positieve bacteriën zullen zichtbaar zijn in primaire kleurstof, d.w.z. paarse kleur. Tegenvlek zal de gramnegatieve bacteriën bevlekken en zal zichtbaar zijn in de pickkleur, wat de safranin-kleur is. Daarom is het gemakkelijk om bacteriën in twee groepen in te delen door de gramkleuring en het is waardevol in bacteriële differentiatie en identificatie.

Figuur 2: Gram-stam

Wat is cultuur?

Microbiële cultuur is een werkwijze voor het kweken en handhaven van micro-organismen onder laboratoriumomstandigheden voor verschillende doeleinden. Culturen worden gekweekt in vaste, halfvaste en vloeibare media op basis van het type en het doel van de kweek van micro-organismen. Culturen worden voorzien van noodzakelijke voedingsstoffen en groeicondities die vereist zijn door de micro-organismen. Er zijn verschillende componenten van een kweekmedium zoals een energiebron, koolstofbron, stikstofbron, mineralen, micronutriënten, water, stollingsmiddel, etc. Optimale temperatuur, zuurstof en pH moeten worden aangepast aan het type micro-organisme dat wordt gekweekt.

Er zijn verschillende soorten microbiële culturen; bijvoorbeeld ladingscultuur, continue kweek, steekkweek, agarplaatcultuur, bouillonkweek, enz. Volgens de samenstelling van het groeimedium zijn er verschillende typen kweekmedia bekend als synthetische media, semi-synthetische media en natuurlijke media. Microbiële culturen worden bereid onder steriele omstandigheden in een speciale kamer genaamd laminaire luchtstroom. Kweekmedium en het glaswerk worden gesteriliseerd voorafgaand aan inoculatie van het gewenste micro-organisme. Onder de juiste steriele omstandigheden wordt doel-micro-organisme overgebracht naar het gesteriliseerde voedingsmedium en geïncubeerd bij optimale temperatuur. In het medium zal het micro-organisme groeien en vermenigvuldigen met behulp van de verstrekte voedingsstoffen.

Figuur 3: Een bacteriekweek op de plaat

Wat is het verschil tussen Gramkleuring en Cultuur?

Gramkleuring versus cultuur
Gram-stam is een differentiële kleuringstechniek die wordt gebruikt voor bacteriële differentiatie en identificatie.	Microbiële cultuur is een methode voor het kweken van micro-organismen in het laboratorium.
Components
Dit gebruikt verschillende reagentia, waaronder twee vlekken.	Dit maakt gebruik van verschillende kweekmedia zoals vaste, halfvaste en vloeibare media samengesteld uit voedingsstoffen en andere noodzakelijke omstandigheden.
Basisfuncties
Dit maakt het groeperen van bacteriën in twee groepen mogelijk: gram-negatief en gram-positief.	Dit maakt vermenigvuldiging van micro-organismen voor verschillende doeleinden mogelijk.
Baseren
Gramkleuringuitkomst is gebaseerd op de verschillen in de peptidoglycaanlaag van de celwand.	Micro-organismen groeien en vermenigvuldigen zich in de kweekmedia.
Resultaat
Gram-negatieve bacteriën zijn zichtbaar in roze kleur en gram-positieve bacteriën zijn zichtbaar in paarse kleur.	Op platen zijn kolonies van de micro-organismen te zien. Op vloeibare media zijn micro-organismen in gesuspendeerde vorm.

Samenvatting - Gramkleuring versus cultuur

Microbiële kweken worden bereid en onderhouden onder laboratoriumomstandigheden voor verschillende doeleinden, zoals opslag, testen, chemische zuivering, enz. Gramkleuring is een kleuringsprocedure die bacteriën in twee hoofdgroepen, genaamd gram-negatieve bacteriën en gram-positieve bacteriën, differentieert. Daarom is het verschil tussen de gramkleuring en de kweek dat gramvlek een kleurtechniek van bacteriën is, terwijl de kweek een methode is voor het kweken en handhaven van micro-organismen in de laboratoria..

Referentie:
1. Aryal, Sagar. "Gramkleuring: principe, procedure, interpretatie, voorbeelden en animatie." Online Microbiology Notes. N.p., 20 september 2015. Web. 1 maart 2017.
2. "Microbiologische cultuur." Wikipedia. Wikimedia Foundation, 1 februari 2017. Web. 1 maart 2017
3. Kumar, Sabarish. "Wat zijn de basistechnieken van microbiële cultuur?" Wat zijn de basistechnieken van microbiële cultuur? N.p., n.d. Web. 1 maart 2017

Afbeelding met dank aan:
1. "Gram-celwand" Graevemoore inglise Vikipeediast (CC BY-SA 3.0) via Commons Wikimedia
2. "Gram Strain" By Y tambe - Y-bestand van tambe (CC BY-SA 3.0) via Commons Wikimedia
3. "Anthrax Culture" door Amerikaanse leger Medical Research Institute of Infectious Diseases foto - (Public Domain) via Commons Wikimedia

Biologie