Waarom Acetocarmine wordt gebruikt in Mitotische chromosoomstudies
Share
Verschillende vlekken worden gebruikt bij het kleuren van verschillende biologische materialen. Vlekken reageren met een specifieke stof in een biologisch monster en geven een bepaalde kleur aan die stof. Acetocarmine is een kleurstof die wordt gebruikt voor de demonstratie van nucleïnezuren in het chromosoom. Er zijn ook enkele andere redenen die acetocarmine geschikter maken als een nucleïnezuurkleuring. Ze worden besproken in dit artikel.
Key Areas Covered
1. Wat is een vlek
- Definitie, soorten vlekken
2. Wat is Acetocarmine
- Definitie, kenmerken, voorbereiding
3. Waarom Acetocarmine wordt gebruikt in Mitotische chromosoomstudies
- Voorbereiding, gebruik van acetocarmine
Sleutelbegrippen: Acetocarmine, Chromosomen, Formaldehyde, Hydrolyse, Mitotisch chromosoom Studies, Vlekken
Wat is kleuring
Kleuring is een techniek die wordt gebruikt in microscopische studies van biologische monsters om het contrast van het biologische monster onder de microscoop te verbeteren. Het benadrukt de structuren van biologisch weefsel, zoals specifieke celpopulaties, organellen, DNA, eiwitten, koolhydraten en lipiden. De vlek kan synthetische chemicaliën zijn of natuurlijke chemicaliën afkomstig van planten of dieren. De kleuringsmethoden worden hieronder beschreven.
- Enkele kleuring - Bij enkele kleuring wordt slechts één kleuring gebruikt om een enkele kleur aan het gehele biologische monster te geven.
- Dubbele kleuring - Bij dubbele kleuring worden twee vlekken gebruikt om specifieke organellen of een specifiek gebied te kleuren.
- Meervoudige kleuring - Bij meervoudige kleuring worden meer dan twee vlekken gebruikt voor de specifieke kleuring van componenten zoals organellen in het monster.
Wat is Acetocarmine
Carmine is een basische kleurstof bereid uit een insect dat bekend staat als Coccus cactussen. Acetocarmine wordt geproduceerd door karmijn te mengen met ijsazijn. Het is een DNA-specifieke kleuring die wordt gebruikt voor de visualisatie van super-coiled chromosomen tijdens de verschillende stadia van mitose.
Voorbereiding van acetokarmijn vlek
- Los 10 g karmijn op in 1 L 45% ijsazijn.
- Voeg aluminiumgranulen toe en laat gedurende 24 uur koken.
- Filteren in donkere flessen en bewaren bij 4 ° C.
- De kleuring kan worden geïntensiveerd door ijzerchloride toe te voegen (voeg 5 ml van een 10% ijzer (III) chloride-oplossing per 100 ml% acetocarmine toe).
Waarom Acetocarmine Stain wordt gebruikt in Mitotic Chromosome Studies
Over het algemeen is acetocarmine een kleurstof die wordt gebruikt bij enkele kleuring. Het kleurt zowel kern als cytoplasma. Om chromosomen te kleuren terwijl het cytoplasma kleurloos blijft, moet het biologische monster eerst met formaldehyde worden behandeld en vervolgens met HCl bij 60 ° C met de juiste hydrolysetijd worden gehydrolyseerd. Ten slotte kan het worden behandeld met acetocarmine. Acetocarmine produceert grote kleurstofaggregaten in zwak zure omstandigheden (pH 4-5). De demonstratie van ui wortelmitose door kleuring met acetocarmine is weergegeven in Figuur 1.
Figuur 1: Mitosis van de uienwortel
Acetocarmine is echter licht toxisch dan de andere nucleïnezuurvlekken zoals aceto-orceïne. Het is ook goedkoper dan andere soorten vlekken.
Conclusie
Vlekken worden gebruikt in microscopische onderzoeken om het contrast van specifieke biologische componenten in een monster te verbeteren. Acetocarmine is een dergelijke vlek die wordt gebruikt voor het kleuren van nucleïnezuur in cellen. Omdat acetocarmine specifiek chromosomen kleurt buiten het cytoplasma, kan het worden gebruikt om chromosomen te visualiseren in mitotische studies.
Referentie:
1. "ACETOCARMINE BEVLEKKEN." Kansas State University, hier beschikbaar.
2.J. A. Rattenbury (2009) Specifieke kleuring van nucleïnezuren met Aceto-Carmine, Stain Technology, hier beschikbaar.
Afbeelding met dank aan:
1. "Onion root mitosis" By staticd - Eigen werk (CC BY-SA 3.0) via Commons Wikimedia
