Verschil tussen in situhybridisatie en immunohistochemie

Belangrijkste verschil - In situ hybridisatie versus immunohistochemie
 

Diagnose van kanker en infectieziekten is een populaire trend waarbij nieuwe op proteomica en genomica gebaseerde technieken worden gebruikt voor het identificeren van tumoren of infectieuze cellen, de proliferatie ervan en de plaatsen van celontwikkeling en het analyseren van de genetische basis van de meest overdraagbare en niet-overdraagbare ziekten. Dit zal resulteren in accurate medicijnverwerking en ontwerpen en in het ontwikkelen van op maat gemaakte therapieën voor ziekten. In situ hybridisatie (ISH) en immunohistochemie (IHC) zijn twee van dergelijke veel gebruikte technieken in de kankerbiologie en het belangrijkste verschil tussen in situ hybridisatie en immunochemie ligt in de moleculen die worden gebruikt in de analyseprocedure. In ISH worden de nucleïnezuursondes gebruikt bij de analyse, terwijl in IHC monoklonale en polyklonale antilichamen worden gebruikt voor de diagnostische bepalingen..

INHOUD

1. Overzicht en belangrijkste verschil
2. Wat is In situ hybridisatie
3. Wat is immunohistochemie
4. Overeenkomsten tussen in situ hybridisatie en immunohistochemie
5. Vergelijking zij aan zij - In situ hybridisatie versus immunohistochemie in tabelvorm
6. Samenvatting

Wat is In Situ Hybridization (ISH)?

In situ hybridisatie is een nucleïnezuurhybridisatietechniek die direct wordt uitgevoerd op een deel of sectie van weefsel, in het gehele weefsel of in cellen. De techniek hangt af van de theorie van Watson Crick complementaire basenparing, resulterend in DNA-DNA-hybriden of DNA-RNA-hybriden die gemuteerde genen kunnen detecteren of het gewenste gen van belang kunnen identificeren. Enkelstrengige DNA-sequenties, dubbelstrengige DNA-sequenties, enkelstrengige RNA-sequenties of synthetische oligonucleotidesequenties worden gebruikt als probes tijdens hybridisatietechniek, en deze probes worden gelabeld met een radioactieve fosfor aan het 5'-uiteinde ervan voor identificatieprocedures na autoradiografie of gelabeld met behulp van fluorescerende kleurstoffen . Er zijn verschillende soorten ISH-technieken beschikbaar op basis van het type probe dat wordt gebruikt en het type visualisatietechniek dat wordt gevolgd.

Afbeelding 01: Fluorescent In Situ-hybridisatie

Er zijn veel toepassingen van ISH, voornamelijk in de moleculaire diagnostiek van infectieziekten om de aanwezigheid van pathogenen te identificeren en om de pathogeen via moleculaire diagnostiek te bevestigen. Het wordt ook gebruikt op het gebied van ontwikkelingsbiologie, karyotypering en fylogenetische analyse en fysieke kartering van chromosomen.

Wat is immunohistochemie (IHC)?

In de techniek van IHC is het belangrijkste molecuul dat wordt geanalyseerd het antigeen. Tijdens IHC worden monoklonale en polyklonale antilichamen gebruikt om de aanwezigheid van antigenen na infectie of kwaadaardige celproliferatietoestand te bepalen. De techniek is gebaseerd op antigeen-antilichaambinding en enzymlabels worden voor deze techniek gebruikt; een dergelijke toepassing is de ELISA (Enzyme linked immunosorbent assay). De markers kunnen ook fluorescent getagde antilichamen of radio-gemerkte antilichamen zijn.

Figuur 02: Immunohistochemie

IHC wordt veel gebruikt voor de detectie van kankercellen. De diagnostische procedures richten zich op de antigenen die aanwezig zijn op de tumorcellen om de tumor te identificeren en karakteriseren. Dezelfde procedure is geïncorporeerd om besmettelijke agentia te diagnosticeren. Monoklonale en polyklonale antilichamen worden ook gebruikt om verschillende genproducten te analyseren door de antilichaam-antigeenbindende reactie tussen het gewenste eiwit en het toegediende synthetische antilichaam mogelijk te maken..

Wat zijn de overeenkomsten tussen in situ hybridisatie en immunohistochemie?

• ISH en IHC zijn zeer specifieke reacties.
• Beide technieken zijn zeer nauwkeurig.
• Beide technieken kunnen worden gebruikt bij diagnostica voor kanker en infectieziekten.
• Deze technieken worden uitgevoerd in steriele in-vitro omgevingen.
• Beide zijn snelle technieken die reproduceerbare resultaten opleveren.
• ISH en IHC gebruiken detectiemethoden zoals radio-labeling en fluorescentietechnieken.

Wat is het verschil tussen in situ hybridisatie en immunohistochemie?

In situ hybridisatie versus immunohistochemie
ISH is een nucleïnezuurhybridisatietechniek die direct wordt uitgevoerd op een deel of sectie van weefsel of het gehele weefsel.	IHC is een techniek waarbij monoklonale en polyklonale antilichamen worden gebruikt om de aanwezigheid van antigenen te bepalen, die speciale eiwitmarkers zijn die op de celoppervlakken worden geplaatst.
Type Bio Moleculen Analyseerd
ISH analyseert nucleïnezuren.	IHC analyseert eiwitten-antigenen.
Basis van de biochemische reactie
Complementaire basenparing tussen DNA-DNA of DNA-RNA komt voor in deze techniek.	Antigen-antilichaam interacties zijn betrokken bij immunohistochemie.
Enzyme-Linked Detection-methoden
Enzym-gekoppelde detectiemethoden kunnen niet worden gebruikt in ISH.	Enzym-gekoppelde detectiemethoden kunnen worden gebruikt in IHC.

Samenvatting - In situ hybridisatie versus immunohistochemie

Moleculaire diagnostiek zijn snelle en bevestigende methoden die kunnen worden gebruikt om een ​​niet-overdraagbare ziekte te identificeren, zoals kanker of overdraagbare ziekten zoals HIV of tuberculose op basis van de moleculaire markers die op de cellen aanwezig zijn en die tot de manifestatie van de ziekte leiden. Moleculaire merkers kunnen aanwezig zijn in de vorm van tot expressie gebrachte eiwitten of op het genetische niveau op basis waarvan verschillende nieuwe technieken worden geïntroduceerd om de efficiëntie te verhogen en zijn minder bewerkelijk, hoewel er hoge kosten aan verbonden zijn met deze technieken. ISH is dus afhankelijk van DNA-DNA of DNA-RNA-hybridevorming en IHC hangt af van de specifieke reacties tussen antilichaam en antigeen. Dit is het verschil tussen in situ hybridisatie.

Download de PDF-versie van In Situ-hybridisatie versus immunohistochemie

U kunt de PDF-versie van dit artikel downloaden en gebruiken voor offline doeleinden, zoals per citaatnotitie. Download hier de PDF-versie Difference Between In Situ Hybridization and Immunohistochemistry.

Referenties:

1. Duraiyan, Jeyapradha, et al. "Toepassingen van immunohistochemie." Journal of Pharmacy & Bioallied Sciences, Medknow Publications & Media Pvt Ltd, aug. 2012, Beschikbaar Hier. Betreden 24 augustus 2017.
2. "In situ hybridisatie (ISH)." Nationaal centrum voor biotechnologische informatie, U.S. National Library of Medicine, Beschikbaar Hier. Betreden 24 augustus 2017.

Afbeelding met dank aan:

1. "FISH (Fluorescent In Situ Hybridization)" Door MrMatze - Eigen werk (CC BY-SA 3.0) via Commons Wikimedia
2. "Immunohistochemicalstaining2" door Imoen op de Engelstalige Wikipedia (CC BY-SA 3.0) via Commons Wikimedia