Verschil tussen RPMI en DMEM
Share
Belangrijkste verschil - RPMI vs DMEM
De meeste onderzoeken hebben betrekking op het kweken van dierlijke cellen en daarom vereisen deze studies het onderhoud van dierlijke cellijnen onder speciale groeiomstandigheden. De celkweek van dieren wordt op grote schaal uitgevoerd in farmacologische studies om het metabolisme van geneesmiddelen te identificeren, in ziektediagnostiek en in kankeronderzoek. De celkweekmedia zijn een belangrijk aspect van dierlijke celkweek. Dulbecco's gemodificeerde Eagle Medium (DMEM) en Roswell Park Memorial Institute Medium (RPMI) zijn twee kweekmedia die worden gebruikt bij het kweken van dierencellen. RPMI is een medium dat op grote schaal wordt gebruikt voor het kweken van zoogdiercellen in een suspensiekweek. DMEM is een gemodificeerd type basaal medium, met verhoogde aminozuur- en vitamineconcentraties tot een factor vier. DMEM wordt gebruikt bij het kweken van cellen in hechtende culturen. Het belangrijkste verschil tussen de twee media is het type cultuur van de media. RPMI wordt gebruikt op suspensiekweken, terwijl DMEM wordt gebruikt voor het kweken van hechtende cellen.
INHOUD
1. Overzicht en belangrijkste verschil
2. Wat is RPMI
3. Wat is DMEM
4. Overeenkomsten tussen RPMI en DMEM
5. Vergelijking zij aan zij - RPMI vs DMEM in tabelvorm
6. Samenvatting
Wat is RPMI?
RPMI of Roswell Park Memorial Institute Medium wordt ook wel aangeduid als RPMI 1640. De naam van de media is afgeleid van het instituut waarin de media zijn ontdekt. Dit medium wordt vaak gebruikt in dierlijke celculturen, in het bijzonder voor de groei van zoogdiercellen. Ze werden oorspronkelijk ontwikkeld om menselijke lymfocyten te laten groeien.
De volgende ingrediënten zijn opgenomen in de RPMI.
- Glucose
- pH-indicator (fenolrood) \
- Zouten (natriumchloride, natriumbicarbonaat, dinatriumfosfaat, kaliumchloride, magnesiumsulfaat en calciumnitraat)
- Aminozuren
- Vitaminen (i-inositol, cholinechloride, para-aminobenzoic zuur, foliumzuur, nicotinamide, pyridoxine hydrochloride, thiamine hydrochloride, calcium pantothenaat, biotine en riboflavine, cyanocobalamine)
Het bijzondere aan RPMI is de verhoogde concentratie van fosfaat in het medium. RPMI wordt gebruikt in een atmosfeer van 5% koolstofdioxide. Dit zorgt voor de maximale en optimale omstandigheden voor de celgroei. De pH van het medium wordt op 8,0 gehouden door het bicarbonaatbuffersysteem.
Figuur 01: Celkweek op een petrischaal
Toepassingen van RPMI in celculturen
- Teelt van menselijke T- en B-lymfocyten, beenmergcellen en hybridoma.
- Gebruikt om menselijke neoplastische cellen te bestuderen.
Wat is DMEM?
Dulbecco's gemodificeerd Eagle's Medium (DMEM) is een gemodificeerd medium dat commercieel wordt bereid. De oorspronkelijke textuur van het mediumpoeder is geel. In DMEM wordt de vitamineconcentratie tot viermaal verhoogd, waardoor het voedingsgehalte in het medium wordt verhoogd.
DMEM wordt ook gemodificeerd door toevoeging van meer zouten zoals ferrinitraat, natriumpyruvaat en sommige niet-essentiële aminozuren zoals serine en glycine. De formulering van glucose in de media is ook veranderd. De oorspronkelijke formulering is samengesteld uit 1000 mg / l glucose, terwijl in DMEM de concentratie wordt verhoogd tot 4500 mg / l. DMEM vereist ook suppletie van een serummedium omdat het geen volledig medium is. Meestal wordt DMEM aangevuld met Fetal Bovine Serum (FBS). FBS levert de vereiste eiwitten en groeifactoren voor het kweekproces.
De pH van het medium varieert bij toevoeging van natriumbicarbonaat. pH van het medium voor toevoeging van natriumbicarbonaat is ongeveer 6,80 - 7,40, terwijl de pH na toevoeging van natriumbicarbonaat ligt in het bereik van 7,60 - 8,20. De opslagtemperatuur van het medium is 2 - 8 0C.
Figuur 02: DMEM
Toepassingen van DMEM
- Om het plaque-vormende vermogen van het polyomavirus in embryonale muizencellen te bestuderen.
- In contact inhibitie studies.
- In onderzoek en analyse van kippenculturen.
Wat zijn de overeenkomsten tussen RPMI en DMEM?
- Zowel RPMI als DMEM worden gebruikt in dierlijke celkweek.
- Zowel RPMI- als DMEM-media zijn vloeibare formuleringen.
- Zowel RPMI- als DMEM-media bevatten de essentiële aminozuren, vitaminen en anorganische zouten die nodig zijn voor groei.
- Zowel RPMI- als DMEM-media zijn onvolledig. Daarom moet serum worden toegevoegd.
- Zowel RPMI- als DMEM-media gebruiken glucose als koolstofbron.
- Zowel RPMI- als DMEM-media hebben een hogere pH.
Wat is het verschil tussen RPMI en DMEM?
RPMI versus DMEM | |
| RPMI is een medium dat op grote schaal wordt gebruikt voor het kweken van zoogdiercellen in een suspensiecultuur. | DMEM is een gemodificeerd type basaal medium met verhoogde aminozuur- en vitamineconcentraties. |
| Aanwezigheid van extra fosfaten | |
| Aanwezig in RPMI. | Afwezig in DMEM. |
| Gebruik | |
| Gebruikt om cellen te kweken in hechtende culturen. Het is gewend om,
|
| Soorten cultuur | |
| RPMI wordt gebruikt voor suspensieculturen. | DMEM wordt gebruikt voor culturen waaraan cellen zijn gehecht. |
Samenvatting - RPMI vs DMEM
Zowel RPMI als DMEM worden veelvuldig gebruikt bij het kweken van dierlijke cellen, in het bijzonder voor het kweken van dierlijke cellijnen waaronder lymfocyten in vitro. DMEM is een gemodificeerd basaal medium met een verhoogde nutriëntenconcentratie. RPMI ontwikkeld door Roswell Park Memorial Institute, en het is ook een medium dat wordt gebruikt voor het kweken van dierencellen, met name voor zoogdierlymfocyten. Beide media zijn in de handel verkrijgbaar. Dit is het verschil tussen RPMI en DMEM.
Referentie:
1. "RPMI Media - RPMI-1640 Media." Sigma-Aldrich. Beschikbaar Hier
2. "Dulbecco's gemodificeerde Eagle's medium - DME, DMEM." Sigma-Aldrich. Beschikbaar Hier
Afbeelding met dank aan:
1.'Cell Culture in a tiny Petri dis'By kaibara87 - oorspronkelijk gepost op Flickr als celcultuur, (CC BY 2.0) via Commons Wikimedia
2.'DMEM celcultuur medium'door Lilly_M - Eigen werk (CC BY-SA 3.0) via Commons Wikimedia
