Het onderzoeksveld heeft een grote wending genomen met de introductie van celkweek en het gebruik van cellijnen voor onderzoek. Verschillende tests worden gedaan op kunstmatig bereide cellen en cellijnen om het gedrag van de cel te beoordelen. Het meeste op mensen gebaseerde onderzoek vereist celcultuur en cellijnen om de resultaten te valideren, vooral wanneer de onderzoeksstudies gebaseerd zijn op farmacologie en geneesmiddelenontdekking. Primaire celkweek is een kweek bereid door directe isolatie van cellen via mechanische of enzymatische werkwijzen. Een cellijn wordt bereid door het continu passeren van een primaire celkweek om een cellijn te verkrijgen die homologe karakters heeft verkregen. De belangrijk verschil tussen de primaire celkweek en de cellijn is het aantal passantietijden die elk van hen bezit. De primaire celkweek wordt direct geïsoleerd terwijl een cellijn wordt bereid door meerdere keren een primaire celkweek door te leiden.
1. Overzicht en belangrijkste verschil
2. Wat is een primaire celcultuur
3. Wat is een cellijn
4. Overeenkomsten tussen primaire celkweek en cellijn
5. Vergelijking zij aan zij - Primaire celkweek versus cellijn in tabelvorm
6. Samenvatting
Primaire celkweek is een celkweekbereiding door cellen direct uit de bron te isoleren via mechanische of enzymatische methoden. De cellen worden geïsoleerd door trypsinisatie of niet-trypsinisatie methoden. De primaire celkweken worden gekweekt in geschikte groeimedia die groeifactoren, hormonen, lipiden en andere ongedefinieerde componenten bevatten. Bepaalde media moeten worden vergezeld door serum. De media zorgen ervoor dat de voorwaarden voor groei worden geoptimaliseerd en de cellen overleven onder optimale omstandigheden. Cellen kunnen worden geïsoleerd uit verschillende weefselbronnen zoals leverweefsel, endotheel en neuraal weefsel bij mensen of hogere dieren via trypsinisatie.
Bij het isoleren van cellen van planten en micro-organismen, worden speciale extractieprocedures gebruikt, die zowel mechanische als chemische methoden gebruiken. Deze geïsoleerde cellen kunnen op een vaste drager worden geïmmobiliseerd of kunnen verschillende generaties worden doorgegeven om tot een cellijn te worden ontwikkeld.
Primaire celculturen bestaan hoofdzakelijk uit twee soorten; Hechtende celculturen en suspensiecelculturen. Hechtende primaire celculturen zijn verankeringsafhankelijk en vereisen een solide ondersteuning voor de groei. De hechtende primaire celculturen zijn hoofdzakelijk afkomstig van weefsels of organen. De primaire celkweken van de suspensie zijn onafhankelijk van de verankering en groeien in vloeibare media. De suspensieculturen moeten tijdens de groeifase continu worden geroerd. De primaire celkweken van de suspensie kunnen rechtstreeks worden afgeleid van bloed.
Primaire celculturen hebben een relatief lagere levensduur, maar de informatie is afgeleid van primaire celculturen onder in vitro voorwaarden vormen de basis voor vele studies. Ze zijn nuttig om de celkenmerken te bestuderen, zowel morfologisch als chemisch gedrag.
Cellijnen worden veel gebruikt in onderzoek en momenteel zijn cellijnen zoals kankercellijnen, levercellijnen en niercellijnen commercieel beschikbaar voor onderzoeksdoeleinden. De cellijnen worden bereid door continue passage van primaire celkweek. Passaging verwijst naar het subcultuurproces waarbij de celkweken worden ontwikkeld tot een cellijn. Deze cellijnen zijn culturen in een tweedimensionale of driedimensionale matrix en worden onderhouden als cellijnen.
Cellijnen worden geclassificeerd als eindige en continue cellijnen. Eindige cellijnen worden onderworpen aan een bepaald aantal passages (20 - 30 passages). Na voltooiing van het vereiste aantal passages gaat de cellijn een stadium van senescentie binnen. Deze cellen zijn gemakkelijk te hanteren omdat hun groei definitief is. De continue cellijnen worden ook wel aangeduid als onsterfelijk gemaakte cellijnen. Deze cellijnen hebben geen bepaald aantal passages. Ze groeien voor onbepaalde tijd en zijn dus in staat om mutaties te verkrijgen. Daarom zijn continue cellijnen eenvoudig gemuteerd en veranderen ze dus in hun morfologische en genetische kenmerken, in tegenstelling tot in eindige cellijnen.
Figuur 01: Cellijn
Cellijnen worden gebruikt omdat het handiger is dan het gebruik van een primaire celkweek omdat het voor een bepaalde periode steeds opnieuw kan worden gebruikt. Maar het is meer vatbaar voor mutaties en contaminaties naarmate hun proliferatie toeneemt.
Primaire celkweek versus cellijn | |
Een primaire celkweek is een kweek bereid door directe isolatie van cellen met behulp van mechanische of enzymatische methoden. | Een cellijn wordt bereid door het continu passeren van een primaire celkweek om een cellijn te verkrijgen die homologe karakters heeft verkregen. |
Aantal passages | |
Primaire celculturen worden niet gepasseerd, cellen worden onder kweekomstandigheden gehouden. | Cellen worden definitief of voor onbepaalde tijd gepasseerd bij het maken van cellijnen. |
Types | |
Hechtende primaire celkweek en Suspensie primaire celkweek zijn twee soorten primaire celkweken. | Eindige cellijn en continue cellijn zijn twee soorten cellijnen. |
Levensduur | |
Primaire celculturen hebben een korte levensduur. | Cellijnen hebben een langere levensduur. |
Primaire celculturen en cellijnen worden veel gebruikt in onderzoek om de gedragspatronen van verschillende cellen onder verschillende omstandigheden en onder verschillende farmacologische aspecten te bestuderen. Primaire celculturen worden direct geïsoleerd van het bronorgaan of -weefsel en worden gekweekt op een kweekmedium. De omstandigheden zijn geoptimaliseerd voor de groei van de specifieke cellen. Cellijnen daarentegen worden bereid door de primaire celkweken voor een eindig of oneindig aantal keren te passeren. Cellijnen zijn in de handel verkrijgbaar en zijn populair bij onderzoekers vanwege het gebruiksgemak.
1.Lonza, Primaire cellen versus cellijnen. Beschikbaar Hier
1. 'Menselijke cellijn kolonie wordt in vitro gekloond door gebruik van kloneringsringen' By Paphrag (CC BY-SA 2.5) via Commons Wikimedia