Verschil tussen stromingscytometrie en FACS

Belangrijkste verschil - Flowcytometrie versus FACS

In de context van celtheorie zijn cellen de fundamentele structurele en functionele eenheid van alle levende organismen. Celsortering is een methodologie die wordt gebruikt om verschillende cellen te scheiden op basis van de fysiologische en morfologische kenmerken. Ze kunnen van intracellulaire of extracellulaire kenmerken zijn. Interactie van DNA, RNA en eiwitten worden beschouwd als intracellulaire interactieve eigenschappen, terwijl de vorm, grootte en verschillende oppervlakte-eiwitten worden beschouwd als extracellulaire eigenschappen. In moderne wetenschap hebben celsorteermethodieken geleid tot het helpen van het verschillende onderzoek in biologische studies en ook in het vaststellen van nieuwe principes door onderzoek naar medicijnen. Het sorteren van cellen wordt uitgevoerd op verschillende methodologieën die zowel primitief met minder apparatuur als geavanceerde technologische methodologieën omvatten met behulp van geavanceerde machines. Flowcytometrie, fluorescent geactiveerde celsortering (FACS), selectie van magnetische cellen en sortering op basis van één cel zijn de belangrijkste toegepaste methoden. Flowcytometrie en FACS zijn ontwikkeld om cellen te differentiëren volgens hun optische eigenschappen. FACS is een gespecialiseerd type flowcytometrie. Flowcytometrie is een methodologie die wordt gebruikt tijdens de analyse van een heterogene populatie van cellen volgens verschillende celoppervlaktemoleculen, grootte en volume waarmee het onderzoek van enkele cellen mogelijk is. FACS is een proces waarbij een monstermengsel van cellen wordt gesorteerd op basis van hun lichtverstrooiing en fluorescentiekarakteristieken in twee of meer containers. Dit is de belangrijk verschil tussen flowcytometrie en FACS.

INHOUD

1. Overzicht en belangrijkste verschil
2. Wat is Flow Cytometry
3. Wat is FACS
4. Overeenkomsten tussen stromingscytometrie en FACS
5. Vergelijking zij aan zij - Flow Cytometry versus FACS in tabelvorm
6. Samenvatting

Wat is Flow Cytometry?

Flowcytometrie is een methode die wordt gebruikt om de expressie van intracellulaire moleculen en het celoppervlak te onderzoeken en te bepalen en om verschillende celtypen te definiëren en te karakteriseren. Het wordt ook gebruikt voor het bepalen van het celvolume en de celgrootte en voor het evalueren van de zuiverheid van geïsoleerde subpopulaties. Dit maakt de multi-parameter evaluatie van afzonderlijke cellen op ongeveer hetzelfde tijdstip mogelijk. Flowcytometrie wordt gebruikt bij het meten van de intensiteit van fluorescentie die wordt geproduceerd als gevolg van fluorescent gemerkte antilichamen die helpen bij het identificeren van eiwitten of liganden die binden aan geassocieerde cellen.

Figuur 01: Flow-cytometrie

In het algemeen omvat flowcytometrie hoofdzakelijk drie subsystemen. Ze zijn de vloeiendheid, de elektronica en de optica. In flowcytometrie zijn vijf hoofdcomponenten beschikbaar die worden gebruikt bij celsortering. Ze zijn, een stroomcel (een stroom vloeistof die wordt gebruikt om ze te transporteren en de cellen uit te lijnen voor optische detectieprocessen), een meetsysteem (kan van verschillende systemen zijn, waaronder kwik- en xenonlampen, watergekoeld met hoog vermogen of luchtgekoelde lasers of diodelasers met laag vermogen), een ADC; Analoog naar digitaal omzettersysteem, versterkingssysteem en een computer voor analyse. De acquisitie is het proces waarmee de gegevens uit de monsters worden verzameld met behulp van flowcytometer. Dit proces wordt gemedieerd door een computer die is verbonden met de flowcytometer. De software die op de computer aanwezig is, analyseert de informatie die vanaf de flowcytometer naar de computer wordt gestuurd. De software heeft ook de mogelijkheid parameters aan te passen van het experiment dat de flowcytometer regelt.

Wat is FACS?

In de context van flowcytometrie, Fluorescentie-geactiveerde celsortering (FACS) is een methode die wordt gebruikt bij het differentiëren en sorteren van een monster van een mengsel van biologische cellen. De cellen zijn gescheiden van twee of meer containers. De sorteermethode is gebaseerd op de fysieke kenmerken van de cel die lichtverstrooiing en fluorescentiekarakteristieken van de cel omvat. Dit is een belangrijke wetenschappelijke techniek, die kan worden gebruikt om betrouwbare kwantitatieve en kwalitatieve resultaten te verkrijgen van fluorescentiesignalen die door elke cel worden uitgezonden. Tijdens FACS, aanvankelijk, het vooraf verkregen mengsel van cellen; een suspensie wordt gericht naar het midden van een smalle stroom vloeistof die snel stroomt. De stroom vloeistof is ontworpen om de cellen in de suspensie te scheiden op basis van de diameter van elke cel. Een trillingsmechanisme wordt toegepast op de stroom suspensie die resulteert in de vorming van individuele druppeltjes.

Figuur 02: FACS

Het systeem is gekalibreerd om een ​​enkele druppel met één cel te maken. Vlak voor de vorming van druppeltjes beweegt de stroomsuspensie langs een fluorescentiemeetapparaat dat de fluorescentiekarakteristiek van elke cel detecteert. Op het punt van vorming van druppeltjes wordt een elektrische oplaadring geplaatst die een lading wordt geïnduceerd naar de ring voorafgaand aan het meten van de intensiteit van fluorescentie. Zodra de druppeltjes zijn gevormd uit de suspensiestroom, wordt een lading ingesloten in de druppeltjes die vervolgens in een elektrostatisch afbuigsysteem terechtkomen. Volgens de lading leidt het systeem de druppels om in verschillende containers. De methode voor het toepassen van de lading varieert volgens verschillende systemen die worden gebruikt in FACS. De apparatuur die wordt gebruikt in FACS staat bekend als een fluorescentie-geactiveerde celsorteerder.

Wat is de gelijkenis tussen flowcytometrie en FACS?

• Flowcytometrie en FACS zijn ontwikkeld om cellen te differentiëren volgens hun optische eigenschappen.

Wat is het verschil tussen stroomcytometrie en FACS?

Flowcytometrie versus FACS
Flowcytometrie is een methodologie die wordt gebruikt tijdens de analyse van een heterogene populatie van cellen volgens verschillende celoppervlaktemoleculen, grootte en volume waarmee het onderzoek van enkele cellen mogelijk is.	FACS is een proces waarbij een monstermengsel van cellen wordt gesorteerd op basis van hun lichtverstrooiing en fluorescentiekarakteristieken in twee of meer containers.

Samenvatting - Stroom Cytometrie versus FACS

De cel is de structurele basis en functionele eenheid van alle levende organismen. Celsortering is het proces waarbij cellen worden geïsoleerd en gedifferentieerd in verschillende categorieën op basis van hun intracellulaire en extracellulaire eigenschappen. Flowcytometrie en FACS zijn twee belangrijke methodologieën bij celsortering. Beide processen zijn ontwikkeld om cellen te differentiëren volgens hun optische eigenschappen. Flowcytometrie is een methodologie die wordt gebruikt tijdens de analyse van een heterogene populatie van cellen volgens verschillende celoppervlaktemoleculen, grootte en volume waarmee het onderzoek van afzonderlijke cellen mogelijk is. FACS is een proces waarbij een monstermengsel van cellen wordt gesorteerd op basis van hun lichtverstrooiing en fluorescentiekarakteristieken in twee of meer houders. Dit is het verschil tussen Flow Cytometry en FACS.

Download de PDF-versie van Flow Cytometry vs FACS

U kunt de PDF-versie van dit artikel downloaden en gebruiken voor offline doeleinden, zoals per citaatnotitie. Download hier de pdf-versie. Verschil tussen flowcytometrie en FACS

Referentie:

1. Flowcytometrie (FCM) / FACS | Fluorescentie-geactiveerde celsortering (FACS). Betreden 22 september 2017. Beschikbaar Hier
2. Ibrahim, Sherrif F. en Ger van den Engh. "Flowcytometrie en celsortering." SpringerLink, Springer, Berlijn, Heidelberg, 1 januari 1970 ... Betreden 22 september 2017. Beschikbaar Hier

Afbeelding met dank aan:

1. 'Cytometer'door Kierano - eigen werk, (CC BY 3.0) via Commons Wikimedia
2. 'Fluorescentie geassisteerde celsortering (FACS) B'By SariSabban - Sabban, Sari (2011) Ontwikkeling van een in vitro modelsysteem voor het bestuderen van de interactie van Equus caballus IgE met zijn hoge affinity FcεRI-receptor (proefschrift), The University of Sheffield,(CC BY-SA 3.0) via Commons Wikimedia