Verschil tussen HPLC en snelle HPLC

De belangrijk verschil tussen HPLC en snelle HPLC is dat de pompdruk die we gebruiken voor HPLC is ongeveer 40 MPa, terwijl de pompdruk voor snelle HPLC rond de 3-5 MPa is.

De meest gebruikelijke techniek die we gebruiken voor het scheiden van componenten van een mengsel is "vloeistofchromatografie". Er zijn verschillende technieken om dit doel te bereiken, waarvan HPLC erg populair is. HPLC staat voor High Performance Liquid Chromatography dat componenten van een vloeibaar mengsel op een snelle en efficiënte manier identificeert, kwantificeert en scheidt. Snelle HPLC is een speciale toepassing van HPLC die de laatste tijd de aandacht heeft getrokken van degenen die betrokken zijn bij de studie van oplossingen.

INHOUD

1. Overzicht en belangrijkste verschil
2. Wat is HPLC
3. Wat is snelle HPLC
4. Vergelijking zij aan zij - HPLC versus snelle HPLC in tabelvorm
5. Samenvatting

Wat is HPLC?

HPLC is hoge prestatie vloeistofchromatografie. Het maakt gebruik van een hoge druk om oplosmiddelen te duwen zodat ze door een kolom gaan. Het is ook een ideale manier om verschillende verbindingen te scheiden en te bestuderen, zoals aminozuren, nucleïnezuren, koolhydraten, steroïden, antibiotica en koolwaterstoffen. HPLC heeft veel voordelen ten opzichte van andere methoden voor het scheiden van mengsels, zoals een hogere resolutie en snellere analyse. Het elimineert de noodzaak van herverpakken en regenereren en biedt betere controle over parameters en dus het vergroten van de efficiëntie van scheiding. In het ideale geval is HPLC geschikt voor grootschalige toepassingen, omdat het zeer kleine deeltjes kan scheiden en het gebruik van hoge drukken mogelijk maakt waardoor oplosmiddelen gemakkelijk kunnen stromen.

Afbeelding 01: HPLC-kolom

In het kort is de werkwijze van de werking van de HPLC-techniek als volgt. Ten eerste zouden we het monster in discrete kleine hoeveelheden in de stroom mobiele fase moeten introduceren met behulp van een pomp. De pompdruk moet op 40 MPa worden gehouden. Deze stroom mobiele fase percolaat door de kolom van HPLC. Vervolgens passeren de componenten in het monster ook de kolom. Hun bewegingssnelheden verschillen echter van elkaar vanwege het verschil in de interacties tussen de monstercomponenten en het adsorbens in de kolom. We noemen dit adsorbens de stationaire fase omdat het zich in de kolom bevindt (niet beweegt). Aan het einde van de kolom kunnen we het monster verzamelen dat uit de kolom elueert, waardoor we de componenten in het monster afzonderlijk kunnen verzamelen.

Wat is snelle HPLC?

Onlangs hebben onderzoekswetenschappers van het onderzoeksinstituut Schering Plough een snelle HPLC-techniek ontwikkeld die een geavanceerde versie van HPLC is, omdat deze een nog snellere scheiding van verbindingen uit een mengsel mogelijk maakt. Deze techniek, ook bekend als snelle HPLC, maakt gebruik van een 2,7um-gesmolten kern-silicadeeltjes die zijn gemaakt door 0.5um poreus silica te smelten over een vast silicadeeltje. Deze uniek gemaakte deeltjes maken de scheidingsprocedure zeer snel en ook bij lage tegendruk dan wat we in HPLC gebruiken.

Afbeelding 02: FPLC-apparaat

Snelle HPLC levert resultaten op die vergelijkbaar zijn met UPLC, maar wetenschappers zijn van mening dat deze techniek superieur is omdat er geen erg dure ultrahoge drukapparatuur voor nodig is. Wat geweldig is, is dat snelle HPLC geen nieuwe laboratoriumprotocollen vereist.

Wat is het verschil tussen HPLC en snelle HPLC?

HPLC is hoge prestatie vloeistofchromatografie en snelle HPLC is een geavanceerde vorm van hoge prestatie vloeistofchromatografie. Het belangrijkste verschil tussen HPLC en snelle HPLC is dat de pompdruk die we gebruiken voor HPLC ongeveer 40 MPa is. Terwijl de pompdruk voor snelle HPLC ongeveer 3-5 MPa is. Verder kunnen we verschillende verbindingen zoals aminozuren, nucleïnezuren, koolhydraten, steroïden, antibiotica en koolwaterstoffen scheiden met behulp van de HPLC-techniek, terwijl de snelle HPLC-techniek voornamelijk wordt gebruikt voor de scheiding van eiwitten.

De onderstaande infographic geeft meer informatie over het verschil tussen HPLC en snelle HPLC.

Samenvatting - HPLC versus snelle HPLC

HPLC is een techniek van vloeistofchromatografie die over de hele wereld erg populair is geworden. Snelle HPLC is een nieuwe versie van HPLC, onderzoekers van het Schering Plough Institute hebben deze nieuwe techniek ontwikkeld. Het belangrijkste verschil tussen HPLC en snelle HPLC is de pompdruk die we gebruiken voor de scheiding. Dat is; de pompdruk die we gebruiken voor HPLC is ongeveer 40 MPa. Maar de pompdruk voor snelle HPLC is ongeveer 3-5 MPa.

Referentie:

1. "Vloeistofchromatografie met hoge prestaties." Wikipedia, Wikimedia Foundation, 20 oktober 2018. Beschikbaar Hier 
"U heeft een fancy systeem nodig om snelle HPLC uit te voeren - of niet?" Snelle HPLC - CHROMacademy. Beschikbaar Hier  

Afbeelding met dank aan:

1. "HPLC kolom" Door Jmave, rcvanwijk - Eigen werk, (Public Domain) via Commons Wikimedia  
2. "Lab's FPLC" By Stephen Helms uit Dallas, TX, Verenigde Staten - FPLC van ons lab, (CC BY-SA 2.0) via Commons Wikimedia