GFP versus YFP
GFP en YFP zijn twee heel verschillende fluorescerende eiwitten afgeleid van Aequorea victoria, een kwal. Veel mariene organismen hebben vergelijkbare groene fluorescerende eiwitten, maar GFP verwijst naar een eiwit dat oorspronkelijk werd geïsoleerd uit deze specifieke kwal. YFP is een genetische mutant van de GFP.
GFP
GFP staat voor Green Fluorescent Protein. Het belangrijkste kenmerk van Green Fluorescent Protein is dat het bij blootstelling aan blauw ultraviolet licht een groene fluorescentie vertoont. GFP is gemaakt van 238 aminozuren. Fluorescerende eiwitten hebben twee pieken, een excitatiepiek en een emissiepiek. GFP vertoont een excitatiepiek bij 395 nm golflengten en de emissiepiek ervan is 509 nm golflengten. 509nm in het zichtbare spectrum is het onderste groene gedeelte. De kwantumopbrengst of QY van groen fluorescerend eiwit is 0,79.quantum opbrengst verwijst naar het aantal keren dat een gebeurtenis optreedt wanneer een door straling geïnduceerd proces plaatsvindt per foton. In dit geval verwijst de "gebeurtenis" naar de emissie van fotonen.
GFP is zeer nuttig geweest in de moleculaire en celbiologie. Het wordt gebruikt als een "reporter van expressie". Reportergenen zijn genen die door wetenschappers en onderzoekers worden gebruikt om zich te hechten aan een ander gen dat ze bestuderen. Ze helpen bij het meten en aangeven of een gen tot expressie is gebracht door een populatie of cel van een organisme. Ze worden ook gebruikt als biosensoren.
Voor de ontdekking van GFP en zijn ontwikkeling kregen Roger Tsien, Osamu Shimomura en Martin Chalfie de Nobelprijs 2008.
YFP
YFP staat voor Yellow Fluorescent Protein. Het is een mutant van de oorspronkelijk afgeleide Green Fluorescent Protein, van de kwal Aequorea Victoria. YPF heeft ook twee verschillende pieken; zijn emissiepiek is 527 nm en zijn excitatiepiek is 515 nm. Het gebruik van YFP is vergelijkbaar of gelijk aan GFP in de moleculaire biologie.
YFP heeft 3 verbeterde versies; Ypet, Citrine en Venus. De speciale kenmerken van deze verbeterde versies zijn dat ze een chloridegevoeligheid hebben die verminderd is en een snellere rijping heeft; ze hebben de helderheid verhoogd vanwege de kwantumopbrengst. Ze worden meestal gebruikt als acceptors voor FRET-sensoren. FRET staat voor Fluorescentie resonantie energieoverdracht. Ze worden ook RET of EET genoemd, respectievelijk resonantie-energieoverdracht en elektronische energieoverdracht. Het is een mechanisme dat de energieoverdracht tussen 2 chromoforen beschrijft.
Samenvatting